高效液相色谱法测定骨宝昕肾片中染料木素的含量(一)

详细内容

【关键词】 高效液相色谱法；,,骨宝昕肾片；,,染料木素

　　摘要：目的用高效液相色谱法测定骨宝昕肾片中染料木素的含量。方法采用Zoobax C18（4.6 mm×250 mm）色谱柱，乙腈水（V∶V=30∶70）为流动相，检测波长270 nm，柱温40℃，流速1.0 ml/min。结果线性范围0.001 752~0.019 272 μg，线性关系良好，回归方程为Y=4 866 020.692 X－20.276，相关系数r=0.999 9，平均回收率为98.89%，RSD为0.91%。结论该法适合测定骨宝昕肾片中染料木素的含量。

　　关键词：高效液相色谱法； 骨宝昕肾片； 染料木素

　　Determination of the Genistein in the Gubaoxinshen Tablets by HPLC

　　Abstract:ObjectiveTo determine the content of the genistein in the Gubaoxinshen Tablets by HPLC.MethodsThe Zoobax C18 Column（4.6 mm×250 mm）was used,the methyl cyanide-water（V∶V=30∶70） mixture as the mobile phase,with the detection at 270 nm,the flow rate was 1.0 ml/min and column temperature was 40℃. ResultsThe linear calibration curves were obtained in the concentration ranges of 0.001 752~0.019 272 μg.The regression equation was Y=4 866 020.692 X－20.276, r=0.999 9.The average recovery was 98.89%,and RSD was 0.91%. ConclusionThis method was convenient,aurate and specified.

　　Key words:HPLC; Gubaoxinshen Tablets; Genistein

　　骨宝昕肾片属于中药二类新药，经过临床证明具有很好的治疗骨质疏松作用，是由大豆、淫羊藿2味中药材经提取等工艺制成，大豆为方中主要药物之一，其主要有效成分为染料木素。鉴于质控标准中无定量指标，不能有效的控制产品内在质量，作者采用高效液相色谱法对该药中的染料木素进行了含量测定。

　　1 材料与方法

　　1.1 仪器、试剂与供试品

　　1.1.1 仪器美国Waters 600 E高效液相色谱仪；Waters 2 487双波长紫外检测器；KQ250型超声波清洗器。

　　1.1.2 试药染料木素对照品购于美国SIGMA公司；乙腈及甲醇为色谱纯；水为二次蒸馏水；骨宝昕肾片为本实验室制。

　　1.2 对照品溶液的制备精密称取染料木素对照品0.19 g，置于5 ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。

　　1.3 供试品溶液的制备取本品20片，除去薄膜衣，研细，取0.2 g，精密称定，置索氏提取器中，用甲醇提取4 h，提取液蒸干，用蒸馏水20 ml加热溶解后，经大孔吸附树脂（直径1 cm，长10 cm）,先用100 ml蒸馏水洗，弃去水洗液，再用95%的乙醇洗脱，收集该洗脱液100 ml，回收乙醇后蒸干，用20 ml流动相定量转移至50ml量瓶中，超声处理（功率为250 W，频率为20kHZ）使溶解，加流动相至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，取续滤液，即得。

　　1.4 方法学考察

　　1.4.1 HPLC色谱条件乙腈水（V∶V=30∶70）为流动相，检测波长270 nm，流速1.0 ml/min。

　　1.4.2 线性范围考察精密称取染料木素对照品适量，加流动相制成每1ml含1.752μg的溶液，精密吸收此溶液各1，3，5，7，9，11μl分别注入液相色谱仪，测定。
以进样量为横坐标，以峰面积值为纵坐标作图，得一条通过原点的直线，回归方程为Y=4 866 020.692 X－20.276，r=0.999 9，结果表明染料木素进样量在0.001 752~0.019 272 μg之间，进样量与峰面积积分值呈良好的线性关系。