不同配比头孢他啶/三唑巴坦钠的体外抗菌活性研究*(一)

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作者：赵龙吟 游雪甫 娄人慧 张伟新 王跃明 陈慧贞

【摘要】 目的 评价不同配比头孢他啶/三唑巴坦(CAZ/TAZ)的体外抗菌活性。方法 采用琼脂平皿二倍稀释法测定不同配比CAZ/TAZ对812株临床分离致病菌的MIC。结果 不同配比CAZ/TAZ(1：1、2：1、4：1、8：1)对812株临床分离菌均有广谱抗菌作用， CAZ/TAZ 1：1、2：1、4：1的抗菌活性相近， 稍强于CAZ/TAZ 8：1。不同配比CAZ/TAZ对产β-内酰胺酶的金葡菌、表葡菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯杆菌、醋酸钙不动杆菌、阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、粘质沙雷氏菌，以及产ESBLs大肠埃希菌、肺炎克雷白杆菌、醋酸钙不动杆菌的抗菌活性比CAZ强2～8倍， 但对产酶的铜绿假单胞菌的抗菌活性与CAZ相近。CAZ/TAZ对不产β-内酰胺酶的金葡菌、表葡菌、铜绿假单胞菌、化脓链球菌、肺炎链球菌的抗菌活性与CAZ相近。CAZ/TAZ对MRSA、MRSE、粪肠球菌的抗菌活性差。结论 不同配比CAZ/TAZ均有较强的体外抗菌活性，CAZ/TAZ 1：1、 2：1、4：1的抗菌活性相近，稍优于CAZ/TAZ 8：1，TAZ增强了CAZ抗产β-内酰胺酶细菌的活性。

【关键词】 头孢他啶/三唑巴坦 头孢他啶 三唑巴坦 最低抑菌浓度

In vitro antibacterial activities of ceftazidime/tazobactam


【Abstract】 Objective To eva luate the in vitro antibacterial activities of ceftazidime/tazobactam(CAZ/TAZ) 1：1，2：1，4：1 and 8：1.Methods The minimal inhibitory concentrations (MICs) of CAZ/TAZ against 812 clinical isolates of bacteria were tested by standard agar dilution method.Results CAZ/TAZ 1：1，2：1，4：1 and 8：1 had broad antibacterial activities against 812 clinical isolates， and the activities of CAZ/TAZ 1：1、2：1 and 4：1 were similar but a little stronger than those of CAZ/TAZ 8：1. The antibacterial activities of CAZ/TAZ 1：1，2：1，4：1 and 8：1 against β-lactamase-producing S. aureus， S. epidermidis， E. coli， K. pneumoniae， A. calcoacetius， E. cloacae， E. aerogenes， S. marcescens， and ESBLs-producing E. coli， K. pneumoniae， A. calcoacetius were 2～8 stronger than those of CAZ. Its antibacterial activity against β-lactamase-producing Ps.aeruginosa was similar to that of CAZ. The antibacterial activities of CAZ/TAZ 1：1，2：1，4：1 and 8：1 against non-β-lactamase-producing S. aureus， S. epidermilis， Ps. aeruginosa， S. pyogenes and S. pneumoniae were similar to those of CAZ. CAZ/TAZ 1：1，2：1，4：1 and 8：1 showed low antibacterial activities against MRSA， MRSE and E.faecalis.Conclusion Ceftazidime/tazobactam 1：1，2：1，4：1 and 8：1 had relatively high in vitro antibacterial activities， and tazobactam enhanced the antibacterial activity of ceftazidime against β-lactamase-producing strains. The activities of CAZ/TAZ 1：1、2：1 and 4：1 were similar but a little stronger than those of CAZ/TAZ 8：1.

【Key words】 ceftazidime/tazobactam ceftazidime tazobactam MIC

三唑巴坦(他唑巴坦，Tazobactam， TAZ)为新型β-内酰胺酶抑制剂，在舒巴坦(Sulbactam， SBT)基础上增加了一个三氮唑环， 是舒巴坦的衍生物，具有广谱抑酶活性，对各种细菌产生的酶均有很强的抑制作用〔1〕，这与三唑巴坦可形成稳定的瞬时中间产物（transient intermediate）有关〔2〕。头孢他啶(Ceftazidime， CAZ)为第三代头孢菌素，抗菌谱广，抗菌作用强，对金葡菌、化脓链球菌、肺炎链球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯杆菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌等均有较强抗菌作用，并且头孢他啶是头孢类中唯一一个对假单孢类细菌有活性的抗生素〔3〕。为评价不同配比CAZ/TAZ和CAZ的抗菌活性，我们进行了体外抗菌活性研究。

1 材料与方法

1.1 药物及其配制 头孢他啶(Ceftazidime， CAZ)批号030113，含量88.4%，珠海区丽珠合成制药有限公司产品；三唑巴钠(他唑巴坦钠，Tazobactam，TAZ)批号03020016，含量92.4%，山东齐鲁制药有限公司产品；头孢哌酮(Cefoperazone，CPZ)批号31810610， 含量93.5%， 珠海联邦制药有限公司产品；舒巴坦钠(Sulbactam， SBT)批号31330103，含量91.6%，珠海联邦制药有限公司产品；均由哈尔滨星火药物研究院提供。哌拉西林(Piperacillin， PIPC)批号0419―9502，含量91.3%，头孢噻肟(Cefotaxime，CTX)批号130483-200102，含量90.6%，头孢他啶(Ceftazidime， CAZ)批号0484-9901，含量84.9%，克拉维酸(Clavulanic acid， CVA)批号429-9301，含量92.0%，苯唑西林(Oxacillin)批号0482-9901，含量90.4%，均为中国药品生物制品检定所标准品。药物配制时按实际活性药物计算。Nitrocefin纸片为美国DIFCO公司产品。

1.2 培养基和试剂 MH肉汤(Mueller-Hinton Broth)培养基、脑心浸液(Brain Heart Infusion)培养基均为美国DIFCO公司产品；MH琼脂培养基、营养肉汤和小牛血清由中国药品生物制品检定所购进。

1.3 细菌 试验菌株为实验室保存典型菌种及2002～2003年从北京地区医院收集的12种812株临床分离菌，革兰阳性菌有：金葡菌148株(MSSA66株、MRSA82株、产β-内酰胺酶金葡菌141株、不产β-内酰胺酶金葡菌7株)、表葡菌110株(MSSE15株、MRSE92株、产β-内酰胺酶表葡菌69株、不产β-内酰胺酶表葡菌38株)、化脓链球菌37株(不产酶)、肺炎链球菌37株(不产酶)和粪肠球菌37株(不产酶)；革兰阴性菌有：大肠埃希菌111株(均产酶，产ESBLs大肠埃希菌17株、不产ESBLs大肠埃希菌94株)、肺炎克雷伯杆菌110株(均产酶，产ESBLs肺炎克雷伯杆菌39株、不产ESBLs肺炎克雷伯杆菌71株)、醋酸钙不动杆菌74株(均产酶，产ESBLs醋酸钙不动杆菌10株、不产ESBLs醋酸钙不动杆菌64株)、铜绿假单胞菌74株(产β-内酰胺酶铜绿假单胞菌65株、不产β-内酰胺酶铜绿假单胞菌9株)、阴沟肠杆菌19株(均产酶)、产气肠杆菌18株(均产酶)和粘质沙雷氏菌37株(均产酶)。合计产β-内酰胺酶细菌644株。

选用金葡菌AT29213、肺炎链球菌AT49619、粪肠球菌AT29212、大肠埃希菌AT25922、AT35218、铜绿假单胞菌AT27853作为质控菌，质控菌MIC均在NLS规定范围内〔４，５〕。

细菌β-内酰胺酶(β-lactamase)用Nitrocefin纸片测定，大肠埃希菌和肺炎克雷白杆菌超广谱酶(Extend-spectrum β-lactamases， ESBLs)用头孢噻肟、头孢噻肟/克拉维酸和头孢他啶、头孢他啶/克拉维酸测定， 耐甲氧西林金葡菌(MRSA)、耐甲氧西林表葡菌(MRSE)用苯唑青霉素(Oxacillin)测定，具体方法均按照NLS规定要求进行〔4，5〕。醋酸钙不动杆菌ESBLs测定参照大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌方法进行。

1.4 仪器 多点接种器(Multipoint inoculator A400)为英国DENLEY公司产品；自动分装器(Automatic dispensor)为美国OXFORD公司产品；二氧化碳培养箱为美国FORMA公司产品；超低温(-80℃)冰箱为日本SANYO公司产品。广州仪科实验室技术公司IKA(r) MS2型液体涡漩混合器。

1.5 最低抑菌浓度(MIC)测定 参照NLS2003标准〔4，5〕， 采用平皿琼脂二倍稀释法和Denlay多点接种器(Multipoint Inoculator A400)进行药敏实验，试验菌用营养肉汤及脑心浸液增菌；药物用MH肉汤二倍稀释成各种所需浓度，分别加适量到平皿中，MH琼脂培养基溶化后定量注入含药液平皿内混匀， 药物的终浓度分别为 0.03……128mg/L， 肺炎链球菌、化脓链球菌和粪肠球菌的培养基内含5%脱纤维的羊血，接种试验菌(接种量约为104CFU/点)后置35℃恒温培养18h(肺炎链球菌培养24h、化脓链球菌置5%CO2培养箱培养24h)后观察结果，无菌生长的平皿中所含药物最小的浓度即为最低抑菌浓度(MIC)。

2 结果

不同配比CAZ/TAZ(1：1、2：1、4：1、8：1)对812株临床分离致病菌的MIC测定结果见表1。结果表明，不同配比CAZ/TAZ对812株临床分离菌均有广谱抗菌作用，CAZ/TAZ 1：1、2：1、4：1的抗菌活性相近， 稍强于CAZ/TAZ 8：1。

表1 CAZ/TAZ及其对照药对812株临床分离菌的MIC测定 (mg/L)

菌名(株数) 药物 MIC范围 MIC50 MIC90

产酶金葡菌(141) CAZ/TAZ 1:1 0.5～>128 16 >128

CAZ/TAZ 2:1 4～>128 16 >128

CAZ/TAZ 4:1 1～>128 16 >128

CAZ/TAZ 8:1 1～>128 32 >128

CAZ 1～>128 128 >128

TAZ 1～>128 >128 >128

PIPC/TAZ 0.5～>128 32 >128

CPZ/SBT 0.125～>128 16 >128

不产酶金葡菌(7) CAZ/TAZ 1:1 4～>128 8 128

CAZ/TAZ 2:1 2～>128 8 >128

CAZ/TAZ 4:1 4～>128 8 >128

CAZ/TAZ 8:1 4～>128 8 >128

CAZ 4～>128 8 >128

TAZ 32～>128 64 >128

菌名(株数) 药物 MIC范围 MIC50 MIC90

PIPC/TAZ 4～128 8 64

CPZ/SBT 1～32 2 32

MRSA(82) CAZ/TAZ 1:1 4～128 64 >128

CAZ/TAZ 2:1 4～128 64 >128

CAZ/TAZ 4:1 4～128 128 >128

CAZ/TAZ 8:1 4～128 >128 >128

CAZ 8～128 >128 >128

TAZ 32～128 >128 >128

PIPC/TAZ 4～128 128 >128

CPZ/SBT 0.125～128 >128 >128

MSSA(66) CAZ/TAZ 1:1 0.5～128 8 128

CAZ/TAZ 2:1 2～128 8 >128

CAZ/TAZ 4:1 1～128 8 >128

CAZ/TAZ 8:1 1～128 8 >128

CAZ 1～128 8 >128

TAZ 32～128 128 >128

PIPC/TAZ 0.5～128 8 32

CPZ/SBT 0.5～32 2 2

产酶表葡菌(69) CAZ/TAZ 1:1 4～>128 64 >128

CAZ/TAZ 2:1 8～>128 64 >128

CAZ/TAZ 4:1 8～>128 64 >128

CAZ/TAZ 8:1 8～>128 128 >128

CAZ 8～>128 >128 >128

TAZ 16～>128 >128 >128

PIPC/TAZ 1～>128 64 >128

CPZ/SBT 1～>128 32 >128

不产酶表葡菌(38) CAZ/TAZ 1:1 4～>128 8 64

CAZ/TAZ 2:1 4～>128 16 64

CAZ/TAZ 4:1 4～>128 16 64

CAZ/TAZ 8:1 8～>128 16 64

CAZ 4～>128 16 128

TAZ 16～>128 128 >128

PIPC/TAZ 0.5～>128 2 16

CPZ/SBTP 0.5～>128 2 32

MRSE(92) CAZ/TAZ 1:1 2～>128 64 >128

CAZ/TAZ 2:1 4～>128 64 >128

CAZ/TAZ 4:1 4～>128 64 >128

CAZ/TAZ 8:1 4～>128 64 >128

CAZ 16～>128 64 >128

TAZ 16～>128 >128 >128

PIPC/TAZ 1～>128 16 >128

CPZ/SBT 1～>128 16 >128

MSSE(15) CAZ/TAZ 1:1 4～>128 8 >128

CAZ/TAZ 2:1 4～>128 8 >128

CAZ/TAZ 4:1 4～>128 8 >128

CAZ/TAZ 8:1 8～>128 8 >128

CAZ 4～>128 16 >128

TAZ 16～>128 32 >128

PIPC/TAZ 0.5～>128 2 >128

菌名(株数) 药物 MIC范围 MIC50 MIC90

CPZ/SBT 0.5～>128 2 >128

化脓链球菌(37) CAZ/TAZ 1:1 0.03～>128 0.25 32

(均不产酶) CAZ/TAZ 2:1 0.015～>128 0.25 64

CAZ/TAZ 4:1 0.03～>128 0.25 64

CAZ/TAZ 8:1 0.03～>128 0.25 64

CAZ 0.015～>128 0.25 64

TAZ 4～>128 64 >128

PIPC/TAZ 0.03～>128 0.125 8

CPZ/SBT 0.06～>128 0.125 32

肺炎链球菌(37) CAZ/TAZ 1:1 0.125～32 0.25 2

(均不产酶) CAZ/TAZ 2:1 0.125～32 0.25 2

CAZ/TAZ 4:1 0.125～32 0.25 2

CAZ/TAZ 8:1 0.125～32 0.25 2

CAZ 0.06～32 0.25 2

TAZ 16～>128 16 64

PIPC/TAZ 0.015～8 0.06 0.5

CPZ/SBT 0.06～16 0.125 0.5

粪肠球菌(37) CAZ/TAZ 1:1 8～>128 128 >128

(均不产酶) CAZ/TAZ 2:1 8～>128 >128 >128

CAZ/TAZ 4:1 16～>128 >128 >128

CAZ/TAZ 8:1 8～>128 >128 >128

CAZ 16～>128 >128 >128

TAZ >128～>128 >128 >128

PIPC/TAZ 4～>128 8 >128

CPZ/SBT 32～>128 64 >128

大肠埃希菌(111) CAZ/TAZ 1:1 0.06～64 0.25 1

(均产酶) CAZ/TAZ 2:1 0.06～128 0.25 2

CAZ/TAZ 4:1 0.06～>128 0.25 2

CAZ/TAZ 8:1 0.06～>128 0.25 2

CAZ 0.06～>128 0.5 4

TAZ 64～>128 >128P >128

PIPC/TAZ 0.5～>128 8 128

CPZ/SBT 0.06～64 1 32

产ESBLs CAZ/TAZ 1:1 0.25～4 1 2

大肠埃希菌(17) CAZ/TAZ 2:1 0.25～8 1 2

CAZ/TAZ 4:1 0.25～8 1 4

CAZ/TAZ 8:1 0.25～8 2 4

CAZ 1～8 4 8

TAZ 128～>128 >128 >128

PIPC/TAZ 8～>128 64 128

CPZ/SBT 8～128 16 32

不产ESBLs CAZ/TAZ 1:1 0.06～64 0.125 1

大肠埃希菌(94) CAZ/TAZ 2:1 0.06～128 0.125 1

CAZ/TAZ 4:1 0.06～>128 0.125 1

CAZ/TAZ 8:1 0.06～>128 0.125 1

CAZ 0.06～>128 0.25 1

TAZ 64～>128 >128 >128

PIPC/TAZ 0.5～>128 8 128

CPZ/SBT 0.06～64 0.5 16

菌名(株数) 药物 MIC范围 MIC50 MIC90

肺炎克雷伯杆菌(110) CAZ/TAZ 1:1 0.06～>128 0.25 4