HPLC测定荜茇三味散中胡椒碱的含量(一)

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作者：那顺朝克图 王烈群 刘宏婧 白广翠 朱晓宇

【摘要】 目的： 建立荜茇（荜茇、诃子、山楂)三味散中胡椒碱的含量测定的方法。 方法：采用高效液相色谱法测定,色谱柱为Kromasil(C18,5um ,250mm×4.6mm)色谱柱，流动相为甲醇?水(77:23)，检测波长为343nm。 结果： 胡椒碱在进样量6.96ug～1.99ug范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.9999,平均回收率为102.9%,RSD为1.4%。结论： HPLC法简单准确,精密度高,分离度良好,可用于荜茇三味散的质量控制。

【关键词】 荜茇 胡椒碱 含量测定 高效液相色谱法

　　Abstract Objective: To determine the content of piperine in the the long pepper?3 powder. Method: Thecontent of piperine in the long pepper?3 powder was determined by RP?HPLC with Kromasil (C18,5um, 250mm×4.6mm) column at room temperature.The mobile phase was methanol?water (V∶V=77∶23) with a flow rate of 1.0 mL・min-1 and the inject?ing volume was 20μL.The external standard was used and the wavelength of the detector was set at343 nm . Results: The linear range was 6.96ug～1.99ug,and correlation coefficient was 0.9999.The average recovery and the relative standard deviation were 103.7%and1.1%,respectively. Conclusion: The method is simple,aurate,and can be used for the quality control of long pepper?3 powder.

　　Key words long pepper; piperine; content determination ; HPLC

　　本品为蒙药荜茇、诃子和山楂三味药材组成的散剂,是一个蒙医验方，此方具有降血脂的作用且临床应用效果好〔1〕。方中荜茇具有温中散寒、下气止痛之功效。荜茇的主要成分为胡椒碱,但蒙药荜茇三味散中胡椒碱的含量测定未见报道。为做进一步的研究和开发，故参考《中国药典》2005版第一部荜茇中胡椒碱的含量测定方法建立了荜茇三味散中胡椒碱的反相高效液相色谱测定法。结果表明,此法操作简便、灵敏度高、重现性好,为有效控制产品质量提供依据。

　　1 仪器与试药

　　1.1 仪器

依利特P?230型高效液相色谱仪（大连依利特科学仪器有限公司）包括：UV230+紫外可见检测器，P?230高压恒流泵，EC2000色谱工作站；AL?204电子天平；溶剂过滤器；AS?3120型超声振荡仪(220V、120W)。

　　1.2 试药

胡椒碱对照品(中国药品生物制品检定所,供含量测定用,批号0775?200203)；荜茇三味散 (由内蒙古蒙药研究院提供)；甲醇为色谱纯试剂。

　　2 方法与结果

　　2.1 色谱条件

色谱柱：Kromasil( C18,5um,250mm×460mm)色谱柱;流动相:甲醇?水(V:V=77:23);流速:1.0ml/min；进样量：20ul;检测波长：343nm;柱温：室温。

　　2.2 测定波长的选择

参考药典(中国药典2005版一部) 荜茇中胡椒碱HPLC法含量测定检测波长在343nm处有最大吸收，故将测定波长确定为343nm〔2〕。

　　2.3 流动相的选择

参考中国药典2005版一部的色谱条件，以甲醇?水(77:23)为流动相，结果胡椒碱与其它组分能有效分离，故选择流动相甲醇?水（77：23）为流动相。

　　2.4 对照品溶液制备

精密称取胡椒碱对照品适量，置50 ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀，制成每1ml含0.4432mg胡椒碱的溶液作为对照品溶液。