胃癌患者EB病毒感染与Cyclin D1基因表达的相关性(一)
详细内容
【关键词】 胃癌患者
Relativity between EBV infection and expression of Cyclin D1 in gastric carcinoma patients
【Abstract】 AIM：To investigate the relativity between the EpsteinBarr Virus (EBV) infection and the expression of Cyclin D1 in gastric carcinoma （GC） patients. METHODS: EBER1 in 217 cases of GC was detected with in situ hybridization. Then, EBV positive and negative GC cases were selected for analysis of the expression of Cyclin D1 by immunohistochemistry. RESULTS: In 217 GC cases there were 23 cases with EBER1 positive expression. The expression of Cyclin D1 was higher in the EBV positive GC than that in the EBV negative (P＜0.01）. CONCLUSION: EBV infection in GC may upregulate the expression of Cyclin D1.
【Keywords】 herpesvirus 4,human； stomach neoplasm； oncogene protein
【摘要】 目的: 研究胃癌患者癌组织中EB病毒（EBV）感染与Cyclin D1表达的关系. 方法: 原位杂交法检测胃癌患者石蜡标本中EBV编码的小RNA（EBER1）；免疫组化法检测EBV阳性胃癌〔EBV（+）〕 及EBV阴性胃癌〔EBV（-）〕标本细胞周期蛋白Cyclin D1的表达状况. 结果: 胃癌患者癌组织标本217例中23例EBER1（+）； EBV（+）组Cyclin D1蛋白表达显著高于EBV（-）组(P＜0.01). 结论: EBV感染可能上调Cyclin D1表达.
【关键词】 疱疹病毒4型，人；胃肿瘤；癌基因蛋白质类
0引言
EB病毒(EBV)可诱发癌基因突变导致肿瘤的发生.如鼻咽癌、机会性淋巴瘤、伯基特淋巴瘤等.有研究认为，EBV感染与胃癌的发生密切相关,但机制未明.我们探讨唐山地区EBV感染与胃癌患者细胞周期素Cyclin D1表达的相关性如下.
1材料和方法
1.1材料2001/2003唐山市工人医院胃癌手术切除标本130例；唐山市开滦医院胃癌手术切除标本47例，遵化市人民医院（2003）胃癌手术切除标本21例，华北煤炭医学院附属医院（2004）胃癌手术切除标本19例. 标本HE染色后行组织病理学观察并做出诊断.同时取相应癌旁组织作对照.
1.2方法采用美国PanPath公司生产的EBER1原位杂交试剂盒进行原位杂交： 石蜡切片经二甲苯脱蜡,乙醇梯度水化,胃酶消化后,与地高辛标记的EBER1寡核苷酸探针（地高辛标记的EBER1寡核苷酸探针，包括antisense探针：5＇AGACAGTTAACGGGACTTGTA3＇；sense探针：5＇TCTGTGGCAGGAGTGGTGGGCTGAACAT3＇）进行杂交反应,洗去剩余探针,用碱性磷酸酶标记地高辛抗体孵育，NBT/BCIP液显色, 甲基绿复染,中性树胶封片, 镜检观察. EBER1（+）细胞核呈深蓝色，在核内及核仁中均可见EBER1表达，而EBER1（-）细胞不着色呈甲基绿复染的颜色．采用Power VisionTM二步法免疫组化法,检测Cyclin D1蛋白的表达. 使用的Cyclin D1 鼠抗人mAb购自北京中山生物技术有限公司. 在染色切片上于细胞核见到均匀棕黄色颗粒分布判为阳性（+），阴性结果不显色，经苏木精复染后，细胞核显示复染的蓝色；对每例切片随机地在100倍显微镜下取10个视野, 录入GD6多媒体彩色图像分析系统，测定Cyclin D1蛋白表达的平均面积(average area, AA)、平均光密度(mean optical density, MOD)、积分光密度(integral opticaldensity，IOD)值.
统计学处理: 以Excel建立数据库，应用SPSS 11.0统计分析软件进行统计学分析；计量资料以x±s表示，组间计数资料采用χ2检验，计量资料采用t检验. P＜0.05认为差异有统计学意义.
2结果
2.1BEER1原位杂交EBER1阳性信号几乎表达在所有癌细胞中，阳性信号表达有的可见癌细胞核，核仁；而EBER1（-）细胞不着色呈复染的绿色（图1）．217例胃癌组织标本检测到23例EBER1（+），阳性率为10.6%；相应癌旁组织均未检测到EBV感染，二者EBER1阳性率有差异(χ2=24.2, P＜0.01).