柴胡加龙骨牡蛎汤有效部位抗抑郁作用研究(一)

详细内容

作者：康大力 瞿融 朱维莉 马世平

【摘要】 　　目的考察柴胡加龙骨牡蛎汤有效部位(CLMAF)抗抑郁作用。方法采用小鼠强迫游泳、悬尾、利血平拮抗、5?羟色胺酸（5?HTP）诱导甩头、慢性应激等抑郁动物模型，观察CLMAF的抗抑郁作用。结果CLMAF 20，40，80 mg/kg均能不同程度地缩短小鼠强迫游泳、悬尾不动时间，能拮抗高剂量利血平降低小鼠体温作用，增加5?HTP诱导小鼠甩头次数，改善慢性应激小鼠被动回避能力。结论CLMAF具有显著的抗抑郁作用。

【关键词】 柴胡加龙骨牡蛎汤； 有效部位； 抗抑郁

　　Abstract：ObjectiveTo study the antidepressant-like effect of Chaihu Jia Longgu Muli Decoction's active fraction(CLMAF). MethodsForced swimming test, tail suspending test, reserpine reversal, 5?Hydroxy?DL?tryptophan(5?HTP) induced head-twitches model and chronic stress test in mice were used to eva luate the antidepressant?like effect of CLMAF. ResultsThe results indicated: after the administration of CLMAF, the immobility time of forced swimming test and tail suspending test in mice were decreased, the temperature drop induced by reserpine was reversed and head-twitch counts induced by 5?HTP increased significantly, the passive avoidance ability was significantly increased in shuttle-box test in chronic stress mice.ConclusionCLMAF possesses a significant antidepressant-like effect.

　　Key words：Chaihu Jia Longgu Muli Decoction(CLMAF)； Active fraction； Antidepressant

　　柴胡加龙骨牡蛎汤有效部位（CLMAF）是从张仲景柴胡加龙骨牡蛎汤中提取的具有一定抗抑郁作用的部位。通过其对皮质酮和谷氨酸所致PC12细胞损伤的保护作用初步判定其可能具有抗抑郁作用。本实验采用整体动物抑郁模型探讨CLMAF的抗抑郁作用。

　　1 器材

　　1.1 动物 ICR小鼠，(20±2) g；雄性SD大鼠，体重160～180 g；均由中国药科大学实验动物中心提供。

　　1.2 药物与试剂 柴胡加龙骨牡蛎汤中各药材人参、桂枝、半夏、茯苓、黄芩、柴胡、大黄、牡蛎、龙骨、生姜、大枣均购自南京市非常大药房,由中国药科大学生药教研室鉴定。5-羟色胺酸（5?HTP）购自瑞士Fluka公司；利血平(批号20050501)，上海复旦复华药业有限公司产品。

　　1.3 仪器玻璃圆筒（高20 cm，直径14 cm），上海医疗器械厂产品；小鼠开阔箱(直径30 cm，高20 cm，底部19等分)；电子肛温计，深圳市胜利电子科技有限公司产品；DCS?2程控穿梭箱，医科院药物所研制。

　　2 方法

　　2.1 CLMAF的制备 柴胡加龙骨牡蛎汤按原方比例制成水煎液。水煎液依次用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取，正丁醇部位上D101大孔树脂柱，先用蒸馏水洗去糖类及其他水溶性杂质，然后用30%乙醇继续洗脱,收集洗脱液，减压回收溶剂至干，即得（提取率0.76%）。

　　2.2 对症状模拟抑郁模型的影响〔1〕动物随机分为5组，分别为模型组，氟西汀组，CLMAF低、中、高剂量组。模型组给予等量蒸馏水，用药组给予相应种类及剂量的药物。每日上午8时ig给药，连续给药7 d。

　　2.2.1 小鼠强迫游泳实验 将小鼠置于水深10 cm，水温25℃的玻璃圆筒中，观察6 min，比较各组小鼠在后4 min内的累计不动时间。不动时间判定：小鼠漂浮在水面，不努力爬出圆筒，仅做一些必须保持其头部在水面的动作。

　　2.2.2 小鼠悬尾实验 将小鼠尾端2 cm的部位贴在一根水平木棍上，使动物成倒挂状态，其头部离台面约15 cm，用板隔开相邻动物的视线。判断标准：小鼠被动悬挂期间，无任何活动时，定为不动状态。观察6 min，比较各组小鼠在后4 min内累计不动时间。

　　2.2.3 小鼠开野实验 小鼠末次ig给药90 min后，将动物置于小鼠开阔箱。比较各组小鼠2 min内水平得分（行走路线与格子交叉点数）、垂直得分（小鼠两前爪腾空或攀附墙壁次数）、清洁次数（动物在清洁身体各部位过程中，使用头、舌和前肢做出的多种动作）。

　　2.3 对药物诱发抑郁模型的影响〔2〕实验分正常组，模型组，氟西汀组, CLMAF低、中、高剂量组, 模型组给予等量蒸馏水，用药组给予相应种类及剂量的药物。每日上午8时ig给药，连续给药7 d。

　　2.3.1 5-HTP诱导的甩头实验 小鼠末次给药90 min后ip5-HTP 200 mg/kg，10 min后开始观察，记录10 min内小鼠甩头次数，比较各组小鼠甩头次数的差异。

　　2.3.2 利血平拮抗实验 小鼠末次给药同时ip利血平5 mg/kg，2 h后将体温计探头插入动物肛门内1.5～2.0 cm处测量肛温，比较各组小鼠肛温变化的差异。