飞蓬提取工艺的研究(一)

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作者：邵帅 严铭铭 王海静 刘琬晖 赵大庆

【摘要】 目的对飞蓬中总黄酮有效部位进行研究，并以此为依据开发中药五类新药。方法以总黄酮和灯盏乙素提取率为评价指标，选取不同提取溶剂和提取方法，利用正交实验L9（34）优选乙醇回流提取飞蓬的工艺。结果飞蓬最佳提取工艺为70%乙醇回流提取3次，1h/次，加醇量为14倍量。结论 优选的工艺稳定可行，可作为开发飞蓬药材资源的参考。

【关键词】 飞蓬 总黄酮 灯盏乙素 正交试验

飞蓬Erigeron acer L．为菊科飞蓬属二年生草本植物，主要分布于我国西南、东北等省区。它与收载于1977年版《中国药典》且在临床上用于治疗心脑血管疾病的中药保护品种灯盏细辛为同属同亚组植物〔1〕。据《长白山植物药志》记载，其根、茎和叶均含鞣质，叶和花中含挥发油；其花和花序可治疗发热性疾病，种子治疗血性腹泻，煎剂治胃炎、腹泻、皮疹、疥疮等〔2〕。目前国内外对飞蓬的研究报道极少，仅有关于其化学成分的报道。现代研究表明飞蓬中主要有效成分之一是黄酮，而其中含量较多的是灯盏乙素（又名野黄芩苷）〔3〕。本文以总黄酮和灯盏乙素的含量为评价指标，优选提取飞蓬中黄酮类有效成分的工艺，为新药研究和充分利用飞蓬药材资源提供参考依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器日本岛津高效液相色谱仪（N2000色谱工作站）；UV－1700紫外分光光度计（日本岛津公司）；超声波发生器（昆山市超声仪器有限公司）；HHSY21-Ni 4-C型电热恒温水浴锅（北京长源实验设备厂）。

1.2 材料飞蓬干燥全草（采自长白山，经长春中医药大学邓明鲁教授鉴定）；野黄芩苷对照品，芦丁标准品（供含量测定用）购于中国药品生物制品检定所；其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 飞蓬总黄酮含量测定

2.1.1 对照品溶液制备精密称取干燥至恒重的无水芦丁对照品5.05 mg置于25 ml容量瓶中，加适量70%的乙醇超声处理5 min，用乙醇定容至刻度，摇匀，得浓度为0.202 mg/ml的对照品储备液。

2.1.2 供试品溶液制备精密称取样品干燥粉末1 g，置于50 ml容量瓶中，加适量70%的乙醇超声处理5 min，用乙醇定容至刻度，摇匀，作为供试品液。

2.1.3 测定波长选择精密吸取芦丁对照品溶液0.5 ml和样品溶液1 ml于具塞试管中，精密加入5%亚硝酸钠溶液0.3 ml，摇匀，放置6 min，再加入10%硝酸铝0.3 ml，摇匀，放置6 min，加4%NaOH溶液4 ml，用70%的乙醇定容至10 ml，摇匀，放置10～15 min。以相同试剂为空白。在400～900 nm波长范围内扫描，记录最大吸收波长为510 nm，见图1。

图1 芦丁和飞蓬样品最大吸收波长图

2.1.4 标准曲线制作精密吸取标准芦丁溶液0.0，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 ml分别加入6支具塞试管中，按照“2.1.3”项操作，于510 nm处测定吸光度。并以吸光度（A）为纵坐标，芦丁对照品溶液浓度（C, mg/ml）为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程： A＝11.227C-0.013，r＝0.999 9（n=6），见图2。结果表明：在0.101～1.01 mg范围内芦丁对照品显色后的吸光度与浓度呈良好线性关系。

图2 芦丁标准曲线图

2.1.5 供试品含量测定取供试品溶液0.2ml于具塞试管中，按照“2.1.3”项下操作，于510nm处测定吸光度,然后根据线性方程计算其总黄酮的含量。