双丹颗粒剂制备工艺的研究(一)

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【摘要】 目的研究双丹颗粒剂制备工艺。方法将处方中丹参、牡丹皮两味药进行水提，以丹皮酚的得率作为考察指标，采用正交实验，HPLC法测定丹皮酚含量，对其得率进行综合评价，优选出最佳的提取工艺。并建立质量标准。结果水提工艺的最佳条件为:加药材9倍量的水回流提取3次，1.5 h/次，丹皮酚的提取率最高。高效液相色谱（HPLC）法测定丹皮酚的含量，丹皮酚在0.004 4～0.022 mg/ml的范围内呈良好的线性关系，r = 0. 997 61。精密性实验RSD为1.4%，稳定性实验RSD为1.81%，回收率为102.158％，RSD＝1.79%。由此证明用丹皮酚的含量可作为双丹颗粒剂质量部分的控制指标。结论该工艺合理，检测方法简便可靠，精密度高；质量标准符合《中国药典》相关部分的规定；初步稳定性较好。

【关键词】 丹皮酚；丹参；牡丹皮；双丹颗粒剂

　　Abstract：ObjectiveTo study the preparation technology of Shuang Dan granules.Methods Danshen Root and Tree peony Bark of were prescription extracted by purified water. With orthogonal design， the extraction rate of paeonol was used as the index. The content of paeonol was determined by HPLC, and the quality standard was established.Results The best plan of extraction technology by purified water was decocted three times，1.5h each time， with nine times purified water added. The extraction rate of paeonol was the highest. The content of paeonol was determined by HPLC. The linear correlation was within the range of 0.004 4 ～0.022 mg/ml,r=0.997 61.Precision of HPLC was well. RSD of precision test was 1.4%，and sample solution was stable. RSD of stability test was 1.81%. The average recovery was 102.158％，RSD＝1.79% .Therefore， it was proofed that the content of paeonol can regulation indexs of Danshen Root and Tree peony Bark granule on quality. ConclusionThe technology is reasonable.The method of detection is convenient and reliable. The precision is high.The quality standard is consistent with rule of related part of pharmacopeia.The primary stability is good.

　　Key words： Paeonol； Danshen Root； Tree peony Bark； Granules

　　双丹颗粒剂（以下简称双丹）的主要成分是丹参和牡丹皮。双丹的主要功效是治疗冠心病及心绞痛，目前，以双丹为主要成分的剂型目前在2005年版《中国药典》上只有液体剂型一种，此种剂型制造技术复杂，成本高，价格昂贵，携带不方便。颗粒剂制造工艺简单，成本低，价格便宜，携带方便，尤其适合小型药厂生产。双丹的主要成分为丹参，别名为血生根、赤参、血参、红根，其为唇形科植物丹参的根及根茎；双丹的另一种成分为牡丹皮，别名丹皮、粉丹皮、木芍药、条丹皮、洛阳花，其为毛茛科植物牡丹的干燥根皮〔1～3〕。近几年来研究认为，牡丹皮中主要有效成分为丹皮酚。大量药理实验证明，丹皮酚具有抗炎、降压以及对中枢神经系统作用，牡丹皮水煎剂还具有广谱抗菌作用。丹皮酚，又称牡丹酚，芍药醇，化学名为2-羟基4-甲氧基苯乙酮，是毛茛科植物牡丹根皮和萝摩科植物徐长卿干燥根或全草的主要活性成分，具有镇静、催眠、解热、镇痛、抗炎、抗菌等药理作用。现代药理研究表明，丹皮酚对心血管系统也有明显的药理作用〔4，5〕。本实验研究双丹的制备工艺。

　　1 材料与仪器

丹皮酚对照品 （中国药品生物制品检定所）。甲醇（色谱级）；环己烷；三氯化铁；醋酸乙酯；95%乙醇；（试剂级）糊精；可溶性淀粉；蔗糖等。
高效液相色谱仪（日本岛津公司 型号：CTO?10AS）； ZDHW 型RP?C18 色谱柱(天津市冠东科技有限公司)；旋转蒸发器RE?3 000yangrong、SHB?95型循环水式多用真空泵（河南省予华仪器有限公司）；调温电热套（河北省黄骅市中兴仪器有限公司）。

　　2 方法

　　2.1 提取每次称取

　　丹参20 g，牡丹皮10 g置于1 000 ml的圆底烧瓶中，在电热套上水煮回流、抽滤，然后利用旋转蒸发装置，浓缩成浸膏。按照正交设计表，提取9份。

　　2.2 高效液相色谱双丹含量分析

　　所用色谱仪条件：Diamonsil C18 ( 4. 6 mm×150 mm，5 μm);流动相为甲醇?水(70∶30);检测波长274 nm;柱温为室温;流速0.6 ml/min。在此条件下丹皮酚与其它组分均能达到基本分离。理论板数以丹皮酚计算，不得低于3 000。称取对照品11.0 mg置10 ml量瓶中，加适量无水甲醇溶解，回归方程为以峰面积Y为纵坐标，对照品浓度X(μg/ml)为横坐标，Y=471.1+124 886.363 6X，r = 0. 997 61，丹皮酚在0.004～0.022 mg/ml的范围内呈良好的线性关系。

　　3 结果

　　3.1 利用蒸煮法提取双丹有效成分

　　每次称取丹参20 g，牡丹皮10 g置于1 000 ml的圆底烧瓶中，在电热套上水煮回流、抽滤，然后利用旋转蒸发装置，浓缩成浸膏。按照正交设计表，提取9份。 选用L9（33）正交表进行实验，以丹皮酚得率作为考察指标。水提因素水平安排见表1，实验安排及结果分析见表2。表1 因素水平（略）表2 正交实验L9(34)表的实验安排及结果（略）

　　由表2的R值结果可看出，各因素对实验结果重要性为B＞A＞C，由此可得出，水提的最佳工艺为A2B1C2，即用药材9倍量的水，回流提取3次，1.5 h/次。第4组样品得率最高， 其高效液相色谱图见图1。

　　3.2 高效液相色谱验证性实验

　　3.2.1 线性关系

　　从对照品溶液中分别移取0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 ml溶液置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，分别得到浓度为0.004 4，0.008 8，0.013 2，0.017 6，0.02 2 mg/ml 5个不同浓度的标准品溶液，分别用平头注射器吸取20 μl，在上述色谱条件下作HPLC分析。峰面积为Y，对照品浓度为X(μg/ml)，得到回归方程为Y=471.1+124 886.363 6X，r = 0.997 61，丹皮酚在0.004 4～0.022 mg/ml的范围内呈良好的线性关系。