综合评分法优化黑豆汁炖何首乌炮制工艺(一)

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作者：田源红， 张丽艳， 杨玉琴， 李健， 徐兰楠

【关键词】 何首乌；,,炮制；,,正交实验设计；,,综合评分

　　摘要：目的优化黑豆汁炖何首乌炮制工艺。方法以何首乌中二苯乙烯苷、多糖、大黄素的含量为指标，采用正交设计综合评分法优化黑豆汁炖何首乌的工艺。结果优化所得工艺为炖36 h，干燥9 h，干燥温度80℃。结论 合理优选出最佳的炮制工艺稳定。

　　关键词：何首乌； 炮制； 正交实验设计； 综合评分

　　AbstractObjectiveTo optimize the technologies of processing in Heshouwu braised. MethodsThe preparation was optimized by using orthogonal design which took the contents of polysaharides, 2.3.5.4'four hydroxy tow cinnamic-2-o-D-glycosides, emodin in Heshouwu.ResultsThe optimized processing braising for 36 hours,drying 9 hours at 80℃were the fairest for all the products.ConclusionIt is suessful to prepare on Heshouwu braised using the optimized technologies of processing.

　　Key wordsHeshouwu； Processing； Orthogonal design process； Colligation score

　　何首乌为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的干燥块根。生品性平，味苦涩，微甘，功能生津润燥，解毒散结；制品性变温，味转甘，具补肝肾、益精血、强筋骨、乌须发的作用。临床多采用制何首乌入药。何首乌中主要含蒽醌、二苯乙烯苷、卵磷脂、糖类等成分。蒽醌具有泻下作用；二苯乙烯苷能降低血清中的胆固醇，具有保肝作用；卵磷脂是构成神经组织特别是脑脊髓的主要成分，也是血球和其他细胞膜的原料，能促进血液中细胞的新生，具有良好的滋补作用，还能使血糖升高，有抗衰老、减轻动脉粥样硬化的作用〔1〕；多糖有良好的抗衰老、补益、强壮作用〔2〕。《中国药典》2005版虽收载了何首乌的炮制方法，但仅做了一般原则性的规定，未规定其关键炮制工艺参数。本实验采用正交实验设计，综合评分法，按照2005版《中国药典》方法炮制何首乌，测定其多糖、二苯乙烯苷、大黄素指标，优化出炮制工艺参数。

　　1 器材

　　1.1 药材何首乌药材购于贵州省凯里地区施秉GAP药材种植基地，经我院周汉华副教授鉴定为蓼科植物何首乌Polygonum multiflorum Thunb.的干燥根。经鉴定、含量测定均符合2005版《中国药典》（Ⅰ部）标准。

　　1.2 仪器AgilentHP1100型高效液相色谱仪（美国），AB204-S型电子分析天平（万分之一，瑞士梅特勒-托利多公司），AE240-型电子分析天平（十万分之一，瑞士梅特勒-托利多公司）。Cintra-20紫外分光光度计（澳大利亚），CS-9301双波长飞点薄层扫描仪（日本岛津），CAMAG-Linomat-IV半自动点样仪（瑞士卡玛），薄层色谱数码相机系统。

　　1.3 试药大黄素对照品（批号：756-8902），二苯乙烯苷对照品（批号：110844-200404）均由中国药品生物制品检定所提供，含量测定用。乙腈为色谱纯，水为娃哈哈纯净水，其余试剂均为分析纯，硅胶G板（青岛海洋化工厂）。苯酚试剂的制备：取苯酚500 g，加铝片0.5 g与碳酸氢钠0.25 g，蒸馏收集180℃馏分，称取此馏分34 g，加水500 g置棕色瓶中备用。

　　2 方法

　　2.1 黑豆汁的制备取黑豆100 g，加水适量，煮约4 h，熬汁约150 g，豆渣再加水煮约3 h，熬汁约100 g，合并黑豆汁约250 g。

　　2.2 黑豆浸出率的测定参照《中国药典》2005版水溶性浸出物含量测定项下方法测定，结果3批次浸出物含量为11.05%～16.46%（n=2）。

　　2.3 炮制品取何首乌片与黑豆汁拌匀，闷润，置蒸锅内密闭，隔水分别炖至药物内外呈棕褐色，取出，干燥〔3〕。每100 kg净何首乌片，用黑豆10 kg。用正交实验方法，按炖制时间、干燥温度、干燥时间作为考察的3个因素，各取3个水平设计实验方案。炮制得到9个样品，粉碎过4号筛，备用。见表1～2。

　　表1 因素水平（略）

　　2.4 考察指标的测定

　　2.4.1 糖含量测定 参照《中国药典》2005版金樱子含量测定项下方法测定〔3〕。结果见表3。

　　2.4.2 二苯乙烯苷含量测定 参照《中国药典》2005版制何首乌含量测定项下方法测定〔3〕。结果见表3。

　　表2 L9(3)4正交实验方案（略）

　　2.4.3 大黄素含量测定 薄层色谱条件：硅胶G板10 cm×10 cm，110℃活化1 h，原点状点样，展开剂为苯∶醋酸乙酯∶冰醋酸（15∶5∶0.3）。薄层扫描条件：双波长反射法锯齿扫描。λS=450 nm，λR=550 nm，狭缝宽度0.4 mm×0.4 mm。对照品溶液的制备：精密称取大黄素标准品14.9 mg置50 ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得0.298 mg/ml大黄素对照品溶液。供试品溶液的制备：取何首乌粗粉约2 g，精密称定，置150 ml平底烧瓶中，精密加入95%乙醇35 ml，加热回流至沸腾，并保持微沸1 h。放冷后，取下，用干燥滤器滤过，置干燥蒸发皿中，在水浴上蒸至10 ml以下，将浓缩后的滤液转移置10 ml容量瓶中，定容至刻度，密闭，即得。标准曲线的制备：用自动点样仪，分别将大黄素对照品溶液1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0，7.0，8.0 μl点于同一硅胶G薄层板上，按上述条件展开，扫描，以峰面积积分值为纵坐标，点样量为横坐标，绘制标准曲线。得回归方程为：A=3 056.2C+808.63，r＝0.997。结果表明，大黄素在0.596～2.086 μg范围内呈良好的线性关系。样品含量测定：分别精密吸取大黄素对照品溶液2，4 μl供试品溶液4 μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，展开，同标准曲线项下操作，扫描、计算含量。结果见表3。

　　2.4.4 醇溶性浸出物的测定参照《中国药典》2005版醇溶性浸出物方法测定，结果醇浸物为6.69%～11.14%。