药用植物鸡骨香的化学成分研究(一)

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作者：杨先会 陈尚文 邓世明

【摘要】 目的研究药用植物鸡骨香根的化学成分。方法用柱色谱法进行分离纯化，通过理化性质和波谱数据分析鉴定其化学结构。结果从鸡骨香根70%乙醇提取物中分离鉴定了7个化合物，分别为Mallotucin B（Ⅰ），Cyperenoic acid （Ⅱ），Ent-spathulenol（Ⅲ），Cyperenol（Ⅳ），Lupeol(Ⅴ)，β-Sitosterol（Ⅵ），Stigmasterol(Ⅶ)。结论除化合物Ⅱ外，其余化合物均首次从鸡骨香根中分离得到。

【关键词】 鸡骨香 提取分离 化学成分

鸡骨香Croton crassifolius为大戟科巴豆属植物，别名千人打、土沉香、黄牛香、鸡角香、透地龙等，主要分布于海南、广东、广西、福建等我国南部地区，越南、老挝、泰国也有分布。其根可作药用，性苦、辛、温；具有行气止痛、祛风消肿、燥湿等功效〔1〕，国内主要用于治疗胃痛和风湿骨痛。泰国学者Laddawan Boonyarathanakornkit等〔2〕报道，该植物有抗癌活性。关于鸡骨香的化学成分，在20世纪80年代，Laddawan Boonyarathanakornkit等进行了初步的研究，从该植物种分离得到4个化合物，即cyperenoic acid， acetylaleuritolic acid，β-amyrin和chettaphanin-Ⅰ，在国内尚未有其化学成分的研究报道。为了补充和丰富该植物的研究内容，为该植物的药用提供理论基础，本实验进一步对鸡骨香根的化学成分进行研究，分离鉴定了7个化合物，其中有6个化合物首次从该植物中分离得到。

　　1 仪器与材料

　　柱层析材料为青岛海洋化工厂生产的100-200，200-300目硅胶；薄层层析材料为青岛海洋化工厂生产的硅胶G，60H，GF254型硅；凝胶Sephadex LH-20为瑞典Amersham Biosciences生产。所用试剂均为工业纯，经过重蒸后使用。

　　质谱由VG Auto Spec-3000质谱仪测定，电离条件为70ev；核磁共振谱由Bruker AM-400.0型核磁共振仪测定（TMS为内标），核磁共振氢谱（1H NMR）在400.13 MHz下测定，核磁共振碳谱（13C NMR）在100.6 MHz下测定。

　　鸡骨香C. crassifolius干燥根0.9 kg，2005²12由海口市中药材公司提供，经海南大学海洋学院邓世明博士鉴定为大戟科巴豆属植物鸡骨香Croton crassifolius Geisel。凭证标本存放于海南大学海洋学院。

　　2 方法与结果

　　2.1 提取和分离鸡骨香干燥根（0.9 kg）粉碎后用70%的乙醇浸提3次，48 h/次，乙醇提取液减压浓缩后加水使成悬浮液，依次用石油醚、醋酸乙酯萃取。

　　石油醚部分提取物（10.5 g）经硅胶柱层析（100～200目），石油醚-醋酸乙酯（10∶1）洗脱，每份收集200 ml，经TLC检测合并相同的流份，得到J1～J8 8个组分。其中J2（1.4 g）组分经硅胶柱层析，石油醚-氯仿（1∶2）洗脱，每份收集50 ml，合并11～15流份，析出晶体，得化合物Ⅱ（84 mg）。J3(1.2 g)浓缩液有方晶析出，溶解后过柱，分别用石油醚-氯仿（1∶15）、氯仿-醋酸乙酯（10∶1）洗脱，每份收集约20 ml，3～8流份再过柱，经氯仿-石油醚（10∶1）洗脱，得化合物Ⅳ（18 mg）。J5经柱层析，用氯仿洗脱，每份收集15 ml，收集6～8流份，得化合物Ⅲ（45 mg），该化合物硫酸显红色；11～16流份过柱，用氯仿-石油醚（10∶1）洗脱，每份收集20 ml，5～8流分经石油醚-丙酮（15∶1）洗脱，得化合物Ⅵ和Ⅶ ；17～22流份过柱，用石油醚-丙酮（20∶1）洗脱，得2～6流份，过凝胶Sephadex LH-20，甲醇洗脱得化合物Ⅴ（0.36 mg）；

　　醋酸乙酯部分提取物用氯仿-醋酸乙酯（20∶1 ～ 4∶1）梯度洗脱，每份收集50 ml，经TLC检测，合并成分相同部分。其中第二部分经过氯仿-丙酮（30∶1）洗脱，每份收集约30 ml，4～18流份经石油醚-丙酮（2∶1）洗脱，得化合物Ⅰ。

　　2.2 结构鉴定

　　2.2.1 化合物Ⅰ无色晶体，易溶于醋酸乙酯，mp:131.5～132.5℃；分子式C24H28O9；质谱 EI-MS：470，417, 324, 292, 264, 94, 81；核磁共振13C-NMR（100.6 MHz, CDCl3）δ：40.7 (C-1), 26.5 C-2), 32.1 (C-3), 57.0 (C-4), 136.3 (C-5), 70.0 (C-6), 32.6 (C-7), 35.7 (C-8),53.9 (C-9), 130.2 (C-10), 18.9 (C-11), 72.3 (C-12), 125.2 (C-13), 107.8(C-14), 144.3 (C-15)， 139.4 （C-16）,16.6 (C-17), 170.9, 171.5 (C-18, C-19), 176.5 (C-20), 170.2 (21)， 52.4， 52.8 （-OCH3）, 21.0 (-CH3)；核磁共振1H NMR（400.13 MHz, CDCl3）δ：2.16 (2H, m, H-1), 2.18 (1H, m, H-2a), 2.02 (1H, m, H-2b), 2.15 (2H, m, H-3), 5.46 (2H, t, J=8.00, H-6, H-12), 1.61 (1H, s, H-7a), 2.05 (1H, m, H-7b), 1.88 (1H, m, H-8), 1.73(1H,s,H-11a), 1.61 (1H, d, J=3.4, H-11b), 6.34 (1H, s, H-14), 7.36 (1H, s, H-15), 7.45 (H, s, H-16), 1.00(3H,d,J=6.68, -CH3), 1.88 (3H, s, CH3CO-),3.72 (6H, s, -OCH3)。核磁共振13C-NMR和核磁共振1H NMR数据与文献〔3〕中化合物Mallotucin B一致，确定化合物Ⅰ为Mallotucin B。其结构式见图1。

　　2.2.2 化合物Ⅱ晶体，易溶于氯仿和石油醚，分子式C15H22O2；质谱 EI-MS ：234，191，178, 163，133，91；核磁共振13C-NMR（100.6 MHz, CDCl3）δ：68.2 (C-1), 25.7 (C-2), 36.3 (C-3), 123.1 (C-4), 173.2 (C-5), 31.3 (C-6), 48.0 (C-7), 26.9 (C-8),27.9 (C-9), 36.0 (C-10), 41.7 (C-11), 26.2 (C-12), 19.3 (C-13), 18.0 (C-14), 171.3 (C-15)；核磁共振1H NMR（400.13 MHz, CDCl3）δ：1.56(1H, m, H-2a), 1.77 (1H, ddd, H-2b), 2.67-2.79 (2H, m, H-3a, H-3b, H-6b), 2.25 (1H, m, ,H-6a), 1.98(1H, m, H-7), 1.38 (1H, ddd, H-8a),1.89 (1H, dddd, H-8b), 1.27 (1H, dddd, H-9a), 1.54 (1H, m, H-9b),2.08(1H, m, H-10), 0.83 (3H, s, H-12), 1.00(3H, s, H-13), 0.87 (3H, d, H-14)。核磁共振13C-NMR和核磁共振1H NMR数据与文献〔2〕化合物Cyperenoic acid基本一致，确定化合物Ⅱ为Cyperenoic acid。其结构式见图1。

　　2.2.3 化合物Ⅲ无色油状物，分子式为C15H24O；EI－MS（m/ z）： 220 (M+) ， 217， 189， 147， 124， 109， 81， 55；核磁共振13C-NMR （100.6 MHz, CDCl3）,δ：53.4 (C-1), 26.7 ( C-2), 41.7 (C-3), 81.1 (C-4), 54.1 (C-5), 30.0 (C-6), 27.5 (C-7),24.7 (C-8), 38.9 （C-9), 153.6 (C-10), 20.2 (C-11), 16.3 (C-12), 28.7 (C-13), 26.1 (C-14), 106.6 (C-15)；核磁共振1H NMR （400.13 MHz, CDCl3）δ：0.44 (1H, d, J=10.4 Hz,H-6), 0.66 (1H, m, H-7), 1.01 (3H, s, H-13)， 1.02 (3H, s, H-12)， 1.26 (3H, s, H-14)，4.62, 4.65 （each 1H, brs, H－15)。核磁共振13C-NMR和核磁共振1H NMR数据与文献〔4〕中化合物Ent-spathulenol一致，确定化合物Ⅲ为Ent-spathulenol。其结构式见图1。

　　2.2.4 化合物Ⅳ晶体，mp：94℃，分子式C15H24O，质谱 EI-MS（m/ z）：219 〔M-1〕+, 203, 189, 175, 133；核磁共振13C-NMR（100 MHz, CDCl3）,δ：65.8 (C-1), 26.1 (C-2), 37.8 (C-3), 131.1 (C-4), 146.2 (C-5), 28.1(C-6), 48.5 (C-7), 27.5 (C-8,C-9), 35.2 (C-10), 41.1 (C-11), 26.1 (C-12), 19.3 (C-13), 17.9 (C-14), 60.6 (C-15)；核磁共振1H NMR（400.13 MHz, CDCl3）δ：1.44(1H, m,H-2a), 1.63 (1H, d, J=13.0 Hz,H-2b), 2.62 (1H, m, H-3a), 2.40 (1H, d, J=15.0 Hz,H-3b), 2.62 (1H, m, H-6a), 2.28(1H, m, H-6b),1.86(1H, m, H-7), 1.25 (1H, m, H-8a),1.72 (1H, m, H-8b), 1.07 (1H, m, H-9a), 1.43 (1H, m, H-9b),1.96 (1H, m, H-10), 0.80 (3H, s, H-12), 0.92 (3H, s, H-13), 0.89 (3H, s, H-14), 4.15 (2H, q, H-15)。核磁共振13C-NMR和核磁共振1H NMR数据与文献〔2〕化合物Cyperenol一致，确定化合物Ⅳ为Cyperenol。其结构式见图1。