蒲公英多糖脱色方法的研究(一)

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作者：陈静， 杨晓杰， 程加春， 李学花

【摘要】 　　目的研究蒲公英多糖的脱色方法。方法采用过氧化氢和壳聚糖两种脱色方法对蒲公英多糖进行脱色。结果过氧化氢脱色的最佳条件为过氧化氢用量25%、温度60℃、时间3 h、pH值9.0；壳聚糖脱色的最佳条件为壳聚糖用量5%、温度25℃、pH值5.1。结论两种方法都能有效的去除蒲公英多糖溶液中的色素。

【关键词】 蒲公英多糖 脱色 过氧化氢 壳聚糖

　　蒲公英Taraxacum officinale是菊科舌状花亚科多年生草本植物，叶可食用，全草均可入药，有清热解毒、止痛散淤等功效，是中医临床上常用的中草药。多糖对细胞免疫和体液免疫功能具有良好的促进作用；具有抗肿瘤、抗辐射、抗突变、抗炎症、抗溃疡、抗感染、抗衰老、抗疲劳等作用〔1〕。然而在多糖的制备过程中，醇沉后的多糖常含有色素，脱色直接影响到产品的质量和色泽，因此寻找合适的脱色条件是提高蒲公英多糖质量的关键。壳聚糖目前在中药分离和澄清精制中有广泛的应用。本实验研究发现壳聚糖能够有效地去除蒲公英多糖中的色素。本研究以蒲公英花为原料，通过正交优化过氧化氢和壳聚糖两种脱色方法，以期为蒲公英多糖的提取、分离及其质量提高提供有效的途径。

　　1 材料与仪器

　　1.1 材料蒲公英，采自黑龙江省五大连池市；壳聚糖，济南海得贝海洋生物公司；30%过氧化氢；无水乙醇。

　　1.2 仪器水浴锅；752N紫外可见分光光度计；旋转蒸发仪；TGL-16G型高速离心机。

　　2 方法

　　2.1 蒲公英粗多糖的制备蒲公英粗多糖的制备采用参考文献〔2〕的方法进行。

　　2.2 多糖含量的测定本试验中采用蒽酮-浓硫酸法测定多糖〔3〕，以葡萄糖为标准品。

　　2.3 蒲公英多糖的脱色

　　2.3.1 工艺流程粗多糖→称重→复溶→加入脱色剂→脱色→测定吸光度和多糖含量。

　　2.3.2 脱色率的测定方法用752N紫外可见分光光度计在色素的最大吸收波长处测其吸光度值〔4〕。得到蒲公英粗多糖溶液的最大吸收值为460 nm, 故选460 nm为测定波长。

　　脱色率(%)=(脱色前吸光度-脱色后吸光度)/脱色前吸光度×100%

　　2.3.3 过氧化氢脱色条件的优选影响过氧化氢脱色的因素很多,参考杨大伟等〔1〕实验结果,选取过氧化氢的用量、脱色温度、脱色时间、pH值，按L9(34)进行设计正交实验。因素设计水平见表1。称取0.2 g蒲公英花多糖溶解于400 ml的蒸馏水中溶解，按正交试验方案进行脱色。脱色液经离心后测定脱色率和多糖含量,以二者作为衡量脱色效率的指标。

　　2.3.4 壳聚糖脱色条件的优选

　　1%壳聚糖的配制〔5〕:称取1 g壳聚糖加入1 ml的冰乙酸加水溶解定容至100 ml，85℃保温45 min，备用。

　　壳聚糖脱色步骤：称取0.2 g蒲公英花多糖溶解于400 ml的蒸馏水中溶解，按正交方案加入不同体积的壳聚糖，搅拌20 min，静止40 min、离心，测定脱色率和多糖含量。