电子探针技术在金银花品质鉴定中的应用(一)
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【关键词】 品质鉴定；,,金银花；,,元素含量；,,电子探针
摘要：目的建立中药材金银花道地性和非道地性及其品质区分新方法。方法利用电子探针技术对同一生境中两种不同种质金银花单个叶肉细胞内元素进行定量分析。 结果生活在石灰土壤环境中的金银花，受环境条件影响其叶细胞中的元素含量共同表征为Ca多Mg少，并且P的含量仅次于Ca的含量；忍冬除Ca含量低于华南忍冬外，其它元素如Mg，P，Mn和Fe的含量均高于华南忍冬，表现出种质差异性。结论 由于不同种质金银花叶内元素含量在细胞水平上存在差异，因而可利用电子探针技术快速、有效地进行金银花等中药材品质鉴定。
关键词：品质鉴定； 金银花； 元素含量； 电子探针
Application of Electron Probe Method on Quality Identification of Flos Lonicerae
Abstract：Objective To develope a new method for distinguishing the geo-authentic and non- authentic species of Flos Lonicerae and identification on the quality of medicinal materials. MethodsThe electron probe was used to analyze the element weight in the cells of two different species of Flos Lonicerae living in the same environment.ResultsThe content of Ca is the highest while the content of Mg is the lowest in the cell of two different species of Flos Lonicerae (r＝-0.156，P0.05) and the content of P in the cell is inferior to Ca (r＝0.868，P0.01), which reflects the effect of environment. Moreover, the important feature is that the elements except Ca in the cell of Lonicera japonica Thunb. are higher than those of Lonicera confusa, which affects its quality and officinal value and forms the grade of medicinal materials.ConclusionThe method of electron probe is effective in appraising and distinguishing the quality of Flos Lonicerae and other medicinal materials because it can be used to distinguish the content of elements in the cell of different Flos Lonicerae, which is controlled by geic factor.
Key words：Quality identification; Flos Lonicerae; Element content; Electron probe
忍冬科忍冬属植物忍冬及同属多种植物的干燥花蕾，俗称“金银花”，具有疏风散热、清热解毒的功效，主要用于急性热病及各种急性感染性疾病，是临床上常用药物之一〔1〕。金银花全身是宝，其茎叶也因含有绿原酸和黄酮等主要药用成分而具有重要经济价值〔2，3〕。
目前全世界忍冬属植物约200种，我国有98种，广布于全国各省区，并以西南部种类最多，其中可供药用的品种达47种〔1~4〕，但传统上以河南和山东为金银花的道地产区。药材的道地性是药材对其适生条件长期选择的结果，具有强烈的地域性，在特定的生境区质量最好、疗效最佳、产量最大，如不同种质金银花药材中的绿原酸和黄酮类成分含量差异悬殊 〔5，6〕，说明种质差异对药用植物有着特殊的潜资源意义。
本文以同一生境中的两种不同种质的金银花叶为材料，运用电子探针微区分析技术，精确分析元素在金银花单个叶肉细胞内的含量，以期获得某些元素在不同种质金银花叶细胞内的变化规律，从而为今后药材品质鉴定以及GAP基地建设提供参考。
1 材料
选取两株相邻的忍冬Lonicera japonica Thunb. 和华南忍冬Lonicera confusa作为研究对象，分别采集同一叶龄(生长期40天)的健壮叶片用于电子探针分析。其中忍冬原产山东平邑，后引种到广西弄拉。
弄拉位于广西南宁地区马山县东南部古零镇境内典型的岩溶峰丛山区。其地理坐标为108°19＇E，23°29＇N。该区位于亚热带季风区，具有高温多雨、降雨集中、湿度大等气候特征。据多年气象观测资料，该区平均气温为19.84 ℃，年平均降雨量为1 700 mm〔7〕。该区地层岩性为泥盆系东岗岭组厚层硅泥质白云岩，因而该区土壤具有偏碱富钙的石灰土特征〔8〕。
2 方法
取忍冬和华南忍冬同一叶龄的新鲜叶片洗净搽干，将其剪成1 cm×1 cm左右的小块，用FAA固定24 h，并经70%，85%，95%，100%，100%的酒精系列脱水，固定在载玻片上。然后，经氩气干燥，精密刻蚀喷镀仪镀金后，在30kV高压下用FEI公司生产的Quanta 200找到单个叶肉细胞，利用EDAX9100能谱仪作为电子探针对叶肉细胞中元素含量进行分析。
3 结果
3.1 金银花叶细胞中主要元素含量特征尽管气候、土壤和人为活动等外界条件对植物的化学元素含量有着直接或间接的影响，但植物本身对元素所具有的选择性吸收能力，是决定其元素含量特征的首要因素〔9〕。
通过分析发现：忍冬和华南忍冬叶细胞中的主要元素含量尽管变化较大，但在很大程度上反映了植物体的化学成分特征。通过图1~2可以看出，这两种金银花叶内元素含量在重量百分比(WT%)方面有许多相似之处，总是Ca最多Mg最少(相关系数0.156，P0.05)，并且P在叶内的含量仅次于Ca(相关系数0.868，P0.01)。这可能与植物在利用Ca时对Mg的吸收具有拮抗作用，而对P的吸收具有协同作用有关〔10,11〕。见图1~2。