高效液相色谱法测定复方三七缓释片中有效成分的含量(一)

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作者：刘波，聂阳，沈嘉茵，谢凯，吴燕红，朱盛山

【摘要】 　　目的建立复方三七缓释片中有效成分的高效液相测定方法。方法采用Agilent C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；以乙腈-0.05%磷酸水溶液（乙腈0～12 min：22%；12～60 min：22%～40%）为流动相梯度洗脱，流速为1 ml・min-1，检测波长为203 nm。结果三七皂苷R1和人参皂苷Rg1，Re，Rb1的线性范围分别为0.373～3.73 μg（r= 0.999 7），0.937～9.37 μg（r= 0.999 1），0.144～1.44 μg（r=0.999 1），0.893～8.93 μg（r=0.999 0）；平均加样回收率（n=6）分别为99.12%，98.86%，99.25%，98.63%，RSD分别为1.31%，1.57%，1.75%，1.68%。结论该测定方法简便可行、重复性好，可用于复方三七缓释片中有效成分的含量测定。

【关键词】 三七；人参皂苷Rg1；人参皂苷Re；人参皂苷Rb1；三七皂苷R1； 高效液相色谱法

　　Abstract：ObjectiveTo establish the method of determining effective ponents in pound Sanqi Sustained-release Tablets by HPLC.MethodsThe contents of notoginsenoside R1, ginsenoside Rg1, ginsenoside Re and ginsenoside Rb1 were simultaneously determined by HPLC conditions as follows：the column was Agilent C18（250 mm×4.6 mm， 5μm）,the mobile phase was CH3-0.05%H3PO4（CH3 0～12 min：22%；12～60 min：22%～40%）, the flow rate was 1.0 ml・min-1, the detection wavelength was 203 nm.ResultsThe linear range of notoginsenoside R1, ginsenoside Rg1, ginsenoside Re and ginsenoside Rb1, respectively, were 0.373～3.73μg（r= 0.999 7）,0.937～9.37 μg（r= 0.999 1）, 0.144～1.44μg（r=0.999 1）,0.893～8.93 μg（r=0.999 0）；the average recoveries(n=4) were 99.12%，98.86%,99.25% and 98.63% respectively, and RSD were 1.31%，1.57%，1.75% and 1.68%. ConclusionThe results indicate that the HPLC method is simple, aurate, highly selective and reproducible, thus it can be used for quality control of pound Sanqi Sustained-release Tablets.

　　Key words:pound Sanqi Sustained-release Tablets； Notoginsenoside R1；Ginsenoside Rg1; Ginsenoside Re； Ginsenoside Rb1; HPLC

　　复方三七缓释片是由三七、冰片等药材和相关缓释辅料制成，具有活血化淤，理气止痛之功效，常用于冠心病、心绞痛的治疗〔1〕。三七中含量最高的两种皂苷是人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1，因此许多含三七的制剂质控指标多限于这两种成分，同时以三七皂苷R1和人参皂苷Rg1，Re，Rb1 4种有效成分作为制剂质控指标的较少。本制剂以上述4种有效成分作为生产的质控指标，采用高效液相色谱法同时测定复方三七缓释片中三七皂苷R1和人参皂苷Rg1，Re，Rb1的含量，能更有效地控制复方三七缓释片的质量。

　　1 器材与样品

　　1.1 仪器

　　BS124S型电子分析天平（德国Sartorius），Agilent1100型高效液相色谱仪。

　　1.2 试剂乙腈（色谱用，Merck公司），超纯水，甲醇（分析纯）。

　　1.3 样品复方三七缓释片(广东药学院中药开发研究所研制)。

　　1.4 对照品三七R1（notoginsenoside R1，110745-200516），人参皂苷Rg1（ginsenoside Rg1，110703-200424），人参皂苷Re（ginsenoside Re，110754-200320），人参皂苷Rb1（ginsenoside Rb1，110704-200318），均供含量测定用，由中国药品生物制品检定所提供。

　　2 方法与结果

　　2.1 色谱条件Agilent C18柱（5 μm，250 mm×4.6 mm）；流动相：乙腈-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱（0～12 min：乙腈浓度为22%；12～60 min：乙腈的浓度由22%递升至40%）；流速为1 ml・min-1，检测波长为203 nm；柱温17℃ ；进样量10 μl。在该色谱条件下，三七皂苷R1和人参皂苷Rg1，Re，Rb1能够达到基线分离，其他成分对测定无干扰。结果见图1～2。