黄芩清肺汤抗菌、抗病毒活性组分的剂量配比研究(一)
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【关键词】 黄芩清肺汤；,,抗菌；,,抗病毒；,,活性组分；,,剂量配比
摘要：目的确定黄芩清肺汤抗菌、抗病毒活性组分的有效剂量配比。方法采用体内实验方法，观察各受试样品的抗病毒、抗菌作用。结果黄芩提取物、栀子提取物、二者不同剂量比例的混合物以及黄芩栀子合提物均具有抗甲、乙型流感病毒、金黄色葡萄球菌、肺炎双球菌的作用。黄芩栀子合提物的有效剂量大于其它提取物（或混合物）。黄芩提取物、栀子提取物以3∶1组成的混合物药效作用较其它受试物为优。结论黄芩清肺汤抗菌、抗病毒活性组分的有效剂量配比为3∶1。
关键词：黄芩清肺汤； 抗菌； 抗病毒； 活性组分； 剂量配比
Experimental Study on the Optimal Active ponent Proportion of Huangqin Qingfei Decoction against Virus and Bacteria
Abstract：ObjectiveTo determine the optimal active ponent proportion of Huangqin Qingfei Decoction against virus and bacteria.MethodsTo observe the anti-virus and anti-bacteria of experimental sample respectively in vivo.ResultsThese samples such as the extraction from Scutellaria baicalensis or Gardenia jasminoides respectively,the extraction admixtures of different proportion, and the extraction from Scutellaria baicalensis and Gardenia jasminoides together, showed the actions against Ⅰ,Ⅱ type flu virus, staphylocous aureus or pneumocous.The largest dosage was that of the extraction from Scutellaria baicalensis and Gardenia jasminoides together.The excellent proportion was that of the extraction from Scutellaria baicalensis three times of the extraction from Gardenia jasminoides.ConclusionThe optimal active ponent proportion of Huangqin Qingfei Decoction against virus and bacteria is the extraction from Scutellaria baicalensis three times of the extraction from Gardenia jasminoides.
Key words：Huangqin Qingfei Decoction; Anti-bacteria; Anti-virus; Active ponent; Proportion
黄芩清肺汤首载于元代罗天益所著的《卫生宝鉴?卷十七》一书中，由黄芩、栀子组成，具有清热泻火、解毒的功效，主治风温肺热病之肺胃火热证见身热、心烦、口渴、咳嗽痰黄等症〔1，2〕。本文研究了其活性组分黄芩提取物（含黄芩总黄酮97%，黄芩苷80%）、栀子提取物（含栀子总环烯醚萜苷84%，栀子苷62%）、二者按不同比例组成的混合物以及黄芩栀子合提物对甲型、乙型流感病毒、金黄色葡萄球菌和肺炎双球菌感染小鼠的保护作用，确定了精简方剂中黄芩提取物、栀子提取物的有效剂量配比。研究成果在中药天然药物五类新药-芩栀胶囊（SFDA药物临床试验批件号：2005 L02273）研制中得到了成功运用。
1 材料
1.1 药品与试剂黄芩提取物，批号：030529，1 g相当于生药14.5 g；栀子提取物，批号：030729，1 g相当于生药20.0g；黄芩栀子合提物，批号：030308，1g相当于生药4.4 g，均由芩栀胶囊课题组提供；利巴韦林胶囊，浙江一新制药有限公司，批号：010105；乙醚，上海马陆化工厂，批号：980209；氯化钠，江苏太仓化工厂，批号：990901；营养肉汤，上海市医学化验所，批号：010927；营养琼脂，上海市医学化验所，批号010324；绵羊红细胞，南京江宁防疫站，批号：020505；胃膜素，中国药科大学微生物室提供。
1.2 动物ICR小鼠，南京医科大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK(苏)2001-0015。
1.3 病毒甲型流感病毒A/PR/8/34、乙型流感病毒B/京防98─76，中国预防医学科学院病毒所提供。
1.4 临床分离菌株金黄色葡萄球菌、肺炎双球菌，江苏省人民医院微生物室鉴定提供。
1.5 仪器FA1004电子天平，上海天平厂；净化工作台，苏州净化设备厂；孵箱，上海分析仪器厂；CO2培养箱，德国贺利氏公司。
1.6 材料中的符号意义H表示黄芩提取物；Z表示栀子提取物；HZ表示黄芩栀子合提物；ZH1、ZH2、…、ZH5表示栀子提取物/黄芩提取物的比值（W/W）为1∶1，1∶2，…，1∶5；HZ1，HZ2，…，HZ5表示黄芩提取物/栀子提取物的比值（W/W）为1∶1，1∶2，…，1∶5。
1.7 统计方法资料统计采用 t检验， χ2检验。
2 方法和结果
2.1 体内抗病毒作用〔3〕
2.1.1 病毒尿囊液的制备取9 d龄鸡胚，无菌接种0.2 ml甲型（或乙型）流感病毒液，37℃恒温培养72 h，吸取尿囊液，弃去混浊部分，重复操作，制备增毒4次的病毒尿囊液。滴鼻感染小鼠，结果甲型流感病毒LD50为1.90，乙型流感病毒LD50为1.23。
2.1.2 对甲型、乙型流感病毒感染小鼠存活率及存活天数的影响取 ICR小鼠270只，体重13~16 g，雌雄各半，随机分为15组，每组18只。各组动物均以10 ml/kg灌胃给药，1次/d，共5d。给药后1 h，在乙醚浅麻醉状态下，以血凝试验640以上的甲型流感病毒尿囊液滴鼻感染小鼠，每只0.03 ml（20个 LD50攻击量）。观察动物感染后发病及死亡情况，记录14 d内动物死亡数，进行组间比较。结果见表1。按上述方法，进行“对乙型流感病毒感染小鼠存活率及存活天数的影响”实验。结果，H组、ZH3组、ZH4组、ZH5组0.8 g（生药）/kg和 HZ组2.7 g（生药）/kg剂量可明显延长甲型流感病毒感染小鼠的存活天数，减少感染小鼠的死亡数,与模型对照组比较，有显著性或极显著性差异(P＜0.05或P＜0.01)。ZH1组、ZH3组、ZH5组0.8 g（生药）/kg和 HZ组2.7 g（生药）/kg剂量可明显延长乙型流感病毒感染小鼠的存活天数，减少感染小鼠的死亡数,与模型对照组比较，有显著性或极显著性差异(P＜0.05或 P＜0.01)。