手法治疗对异常应力下兔颈椎间盘组织中蛋白多糖的影响(一)

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作者：夏数数，丁明桥，熊勇，杨勇，徐金容，邹季

【摘要】 　　目的探讨手法治疗对异常应力环境下兔颈椎间盘（intervertebral disc，IVD）组织中蛋白多糖（proctologycan，PG）的影响，寻找预防和延缓椎间盘退变的方法。方法将24只日本大耳兔随机分为正常组、模型治疗组和模型组。按要求处理两个月后，测出颈椎间盘C５/６椎间盘组织蛋白多糖主要组成糖氨多糖（glycosaminoglycan，GAG）的量。结果正常组、模型治疗组中GAG含量明显高于模型组（P0.05）；而正常组与模型治疗组之间无显著性差异（P>0.05）。结论在椎间盘组织退变的早期，手法治疗可以抑制颈椎间盘组织GAG的含量降低，从而起到延缓椎间盘退变的作用。

【关键词】 椎间盘 退变 手法 蛋白多糖

　　Abstract：ObjectiveTo investigate the effect on the content of PG of IVD in the abnormal stress state by invention of manipulation and to study the method of preventing and retarding the degeneration of IVD.MethodsTwenty-four Japanese white rabbits were randomly divided into three groups: control group, model therapy group and model group. The rabbits were handled aording to the requirement. Eight weeks later, the weight of wet IVD was calculated, the content of GAG was detected. ResultsThe results showed that the content of GAG of IVD in either control group or model therapy group was higher than that of the model group (P0.05) and there was no difference between control group and model therapy group (P>0.05). ConclusionAbnormal stress may decrease the content of GAG in IVD and induce the degeneration of IVD. Meanwhile, manipulation may increase the content of GAG of IVD in the abnormal stress state. We infer that manipulation may prevent and retard the degeneration of IVD in the early stage.

　　Key words：Intervertebral disc; Degeneration; Manipulation; Proteoglycan

　　颈椎病是临床上一种常见的病症，颈椎间盘退变是颈椎病的主要病理基础。研究发现椎间盘组织中蛋白多糖（PG）的含量减少是椎间盘退变的早期表现之一。本实验对处在造模过程中兔颈部进行手法治疗以抑制PG的减少，从而起到延缓椎间盘退变的作用。

　　1 材料与仪器

　　1.1 试剂

　　0.1 mol/L NaOH，6 mol/L HCl，胰蛋白酶，60%三氯醋酸，1mg/ml氨基半乳糖，乙酰丙酮，乙醇，对二氨基苯甲醛。

　　1.2 仪器水槽、匀浆器、试管、离心机、医用恒温箱、分光光度计、电子天平。

　　2 方法

　　2.1 动物及分组

　　将24只日本大耳兔，雌雄不限，随机分为3组：正常组、模型组和模型治疗组，每组8只。

　　2.2 动物模型的复制

　　采用应氏〔1〕造模方法，将模型组、模型治疗组动物分别固定在特制的笼子里，使兔子处于低头屈曲45°，1次/d，5 h/次，其余时间放在笼子中自由饲养；正常组的兔子不做低头屈曲颈部固定，颈部可以自由活动，其他处理跟上述二组兔子处理一样。

　　2.3 手法干预

　　模型治疗组的兔子每次在固定松解后施加手法干预，具体方法：运用三指拿法、按揉法循足太阳膀胱经和督脉对兔颈椎两旁的肌肉操作，使肌肉放松，约5 min。然后，用中度力量按压风池、天柱、肩井、百会等穴，约3～4 min。重复上述操作两次，最后用揉法、捋法结束手法，约1 min。

　　2.4 取材及处理

　　造模8周后，从兔耳静脉注射10 ml空气将其处死,迅速从颈椎后正中线切开皮肤，逐层分离颈椎两旁的肌肉韧带，直达椎体。从枕骨大孔下将头和寰椎分离，从第7颈椎下将颈椎和胸椎进行分离，取下整个颈段脊椎。将取下的新鲜颈段椎体迅速放在冰面上，用眼科剪刀、镊剥离椎间小关节和椎体前方的软组织，分别从C５椎体下缘和C６椎体上缘分离上、下软骨终板，取出C５/６椎间盘组织，液氮速冻，-70℃下保存。

　　2.5 蛋白多糖的测定

　　称取椎间盘组织，提取GAG，测定GAG的量〔2〕。

　　2.6 统计学处理

　　将检测的数据PEMS3.1软件系统，计算出各组兔C５/６椎间盘组织中GAG的测定值的±s，并作t检验。

　　3 结果

　　模型治疗组、正常组之间比较，兔颈椎间盘组织GAG的含量无显著性差异(P＞0.05)；模型治疗组、正常组兔颈椎间盘GAG的含量比模型组高，存在显著性差异(P0.05)。结果见表1。表1 兔C５/６椎间盘组织中GAG含量的测定值比较（略）

　　4 讨论

　　颈椎病在祖国医学属痹症、眩晕、萎症等范畴。中医认为椎间盘局部缺少精、气、血的濡养，导致椎间盘的“虚”，椎间盘的亏虚为其内因。各种损伤以及外邪的反复侵袭造成气血损伤，导致气滞血瘀，伤精耗气，致使椎间盘组织进一步失去濡养，从而加快椎间盘的退变，引发颈椎病，出现肩颈疼痛、颈项活动受限、头晕、手指麻木等症状。