杜仲提取物的亚慢性毒理学研究(一)

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作者：刘月凤，陈建文，龚朋飞，袁慧

【关键词】 杜仲；,,亚慢性毒性

　　摘要：目的研究不同剂量的杜仲提取物水溶液对小鼠亚慢性毒性作用，为临床应用提供依据。方法给实验小鼠灌服不同剂量的杜仲提取物水溶液。在实验中、末期停药后24 h，分别取血测定血液学、血液生化和主要脏器指标，并作病理切片。结果灌胃中、低剂量（2.06 g/kg，0.69 g/kg）的杜仲提取物水溶液，能够提高小鼠血红蛋白含量和红细胞数（P＜0.01），对白细胞分类计数无影响，同时能够提高小鼠体重、总蛋白及白蛋白含量（P＜0.01），对脾脏、肝脏、心脏、肺脏、肾、性器官指数及血清酶活性无影响（P＞0.05）。结论杜仲提取物对受试动物未见有明显毒性作用。

　　关键词：杜仲； 亚慢性毒性

　　Studies on the Subchronic Toxicology of Eumia ulmoides Extract

　　Abstract：ObjectiveTo research the effect of Eumia ulmoides extract solution on mice subchronic toxicity,to provide basis for clinical use.MethodsGave experiment mice different doses of Eumia ulmoides extract solution,in mediumterm and after administration for 24 h, blood physiological, blood chemistry,the main viscera coefficient were tested.ResultsBy gastrogavage,the middle and low dose of Eumia ulmoides extract solution improved the content hemoglobin(Hb) and red blood cell count,but had no effect on white blood cell count (P＜0.01). It increased mice weigt、total protein content、white protein content (P＜0.01) ,but had no effect on indexes of spleen, live, heart, lung, kidney, sexual an and the activation of serum enzyme (P＞0.05) .ConclusionEumia ulmoides extract has no toxicity to mice.

　　Key words:Eumia ulmoides; Subchronic toxicity

　　我国对杜仲（Eumia ulmoides）的利用历史悠久，近几年我国学者在杜仲的生物学、化学成分、生理生化等方面做了许多研究，已知杜仲的化学成分主要有：（1）木脂素类；（2）环烯醚萜类；（3）酚类化合物等，唐建军〔1〕、李家实等〔2〕认为，杜仲中有效成分对动物血压有双向调节功能。唐建军等〔1〕报道：杜仲含有丰富的VE和 β-胡萝卜素，有延缓衰老、增强机体免疫体力作用。为了更好地开发利用杜仲，我们探索了张家界产杜仲提取物（以下简称杜仲提取物）对动物亚慢性毒性作用，并为临床应用提供一定的理论依据。

　　1 材料

　　1.1 药品与动物杜仲提取物：主要成分：80%氯原酸，由张家界恒兴生物科技公司提供。昆明种小鼠，雌雄各半，体重（20±2）g，8周龄，购于湖南中医学院实验动物中心，批号：990218。

　　1.2 仪器ES-C300A电子天平，湘仪天平仪器厂。MD-100自动生化分析仪器仪。美国 Leyte Drive Torranle化学仪器公司生产。

　　2 方法与结果

　　2.1 小鼠最大耐受量采用最大给药量〔3〕法，在预试基础上，取小鼠100只，雌雄各半，体重（20±2）g，随机分成5组，分次灌服不同剂量杜仲提取物水溶液0.5 ml/次，观察7 d内动物死亡数，同时观察动物一般状况及活动情况。结果见表1。动物在7 d内均无异常反应，考虑到杜仲的浓度以及小鼠的灌胃容积都已达到最大，因此，杜仲提取物的小鼠灌胃最大给药量应大于18.52 g/kg。按小鼠的平均体重为20 g，成人平均体重60 kg，成人每日用量6~9 g〔4〕计算，小鼠的最大耐受倍数=18.52×60/9=124（倍），故认为本药具有较大的安全性。

　　2.2 杜仲提取物对小鼠的亚慢性毒性实验〔5，6〕取健康小鼠80只，体重为（20±2） g，雌雄各半，分笼颗粒饲料喂养，将小鼠随机分为3个剂量组6.17，2.06，0.69 g/kg和1个对照组（生理盐水）。各组分别以0.5 ml/次容量灌胃：1次/ d，连续8周，每周停药2 d，期间每周称重，并根据体重调整药量。同时观察动物的一般体征。实验中、末期停药后24 h，测定血液学指标 Hb，RBC，WBC和白细胞分类计数（DC）及血液生化指标（TP，ALB，AST，ALT，BUN，ALP和GLu），两次采血后分两批处死动物，对（心、肝、脾、肺、肾、性腺）主要脏器计算脏器重量系数，并做病理切片检查。

　　表1 小鼠灌胃给药最大耐受量（MTD）的测定(略)

　　2.2.1 杜仲提取物对小鼠体重的影响结果由表2可看出，各组小鼠在第4，8周时，中、低剂量组（2.06，0.69 g/kg）与对照组差异极显著（P＜0.01），出现明显的增重。第8周时，高剂量组与对照组差异不显著（P＞0.05）。

　　2.2.2 小鼠血液学指标的变化结果见表3。由表3可知，实验第4，8周时，浓度为2.06，0.69 g/kg杜仲的提取物能够显著提高小鼠的Hb含量及RBC（P＜0.01）。在6.17 g/kg的浓度水平下，第4周杜仲提取物显著提高小鼠的 Hb含量及RBC（P＜0.05），第8周与对照组比较无显著差异（P＞0.05）；实验组N，L，E，M计数与对照组比较均差异不显著（P＞0.05）。