HPLC测定VC银翘片中连翘苷的含量(一)

详细内容

【摘要】 目的 建立VC银翘片中连翘苷的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法测定，用C18柱（4.0mm×250mm，5μm），以乙腈-水（25:75）为流动相，检测波长277nm。结果 连翘苷的线性范围为0.4～3.0μg；连翘苷平均回收率为99.28%，RSD=2.81%(n=5)。结论 所用方法测定样品灵敏度高，重复性好，能有效地控制VC银翘片的质量。

【关键词】 VC银翘片；连翘苷；HPLC；含量测定

1 仪器与试药

仪器：Waters 600E液相色谱仪；Waters 600泵，Waters2997光电二极管矩阵检测器；Millennium32色谱工作站。FA1004电子分析天平(上海良平仪表有限公司)，KQ3200超声清洗器(中国昆山市超声仪器有限公司) 。连翘苷（供含量测定用，中国药品生物制品检定所，批号：110821-200406）。

试剂及试样: 乙腈为色谱纯,其余试剂均为分析纯,水为重蒸水,VC银翘片（自制）。

2 含量测定

2.1 色谱条件〔1〕 色谱柱Symmetryshield(Rp18 4.6mm×250mm) ;乙腈-水（25:75）为流动相；检测波长277nm；流速1ml/min；柱温23℃。

2.2 对照品溶液的制备 精密称取连翘苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，摇匀，即得。

2.3 样品供试液的制备 精密称取VC银翘片除去糖衣研细后的粉末3.500g，置居塞锥形瓶中，精密加入甲醇45ml，称定重量，浸渍过夜，超声处理25min，放冷至室温，再称定重量，补加甲醇至原重量。摇匀，滤过，弃去初滤液。精密量取续滤液15ml，蒸至近干，加中性氧化铝1.5g拌匀，加至中性氧化铝柱（100～120目，3g，内径1～1.5cm）上，用70%的乙醇240ml洗脱，收集洗脱液，浓缩至干，残渣用50%甲醇溶解，转移至15ml容量瓶中，并用50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液为供试品溶液。

2.4 系统适用性试验 分别精密吸取对照品溶液， VC银翘片供试液，缺连翘的阴性样品供试液各10μl，注入HPLC仪，按上述色谱条件测定。

2.5 线性关系考察〔2〕 分别精密吸取对照品溶液2、3、5、10、15μl，按上述色谱条件，注入高效液相色谱仪，记录峰面积。以峰面积对进样量（μg）回归，得回归方程C= 1.5812×10-6-0.04196，相关系数r =0.9999，表明连翘苷在0.4～3.0μg之间线性关系良好。