大鼠肝动脉插管并体外留置模型的改进(一)

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作者：孟琼，张涛，余望贻，雷磊，尹胜，曾润清

【摘要】 目的 对体外留置肝靶向性给药途径的大鼠动脉插管模型进行改进，并探讨建立此模型的技术要点。方法 在10倍手术显微镜下，采用特制内径0.5 mm导管（由硬膜外麻醉导管加工而成）经胃十二指肠动脉剪口处插入肝动脉血管内，逆行到达肝固有动脉开口处后留置导管并固定。结果 20只大鼠造模，成功者17只，成功率为85%。结论 改进型大鼠肝动脉插管并体外留置模型较以往造模方法简单，并提高了模型成功率，技术易于推广，可应用于抗肝肿瘤、肝衰竭等靶向性给药的研究。

【关键词】 大鼠；肝动脉插管；体外留置；改进

〔Ａｂｓｔｒａｃｔ〕 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ To improve the model of hepatic artery(HA) catheter and detain the catheter in vitro in rats, and approach the skill keys and value of establishing the model. Method Under the operation microscope(10×), a self-made catheter with 0.5mm ID, developed by peridural anesthetic catheter, was intubated into hepatic artery, through gastroduodenal artery, then the catheter was retained and fixed in rats. Result 20 rats were used to establish the model， in which 17 rats model were suessful, the ratio was 85%. Conclusion The improved model is much easily established and achievement ratio is higher than others, which may be used to study on targeting administration in curing liver tumor or hepatic failure.

〔Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ〕 Model; rats; HA catheterization; detaining in vitro; improvement

肝固有动脉插管的动物模型建立早有报道，但原有的方法易造成肝脏损伤、死亡率高，技术难以掌握。在实验研究中我们改进造模方法，掌握了技术要点，取得较为满意的效果，现将实验方法报道如下。

1 材料与方法

1．1 材料

1．1．1 动物 健康SD大鼠20只，清洁级，体质量（300±50）g，雌雄各半。由湖南农业大学动物实验中心提供，合格证号sck(湘）2003-0003。

1．1．2 手术器械 止血钳4把，有齿镊、持针器各1把，12.5 cm显微镊1把，14 cm显微剪1把，系线镊2把，小动脉夹数枚，缝合针数枚，0号、4号缝合丝线各数支，自制内径0.5 mm动脉插管数根（由硬膜外麻醉导管加工而成）。

1．1．3 仪器 Z20P5 10倍手术显微镜：苏州六六视觉科技股份有限公司；ES-1100型电子天平：长沙湘平科技发展有限公司。

1．1．4 药品 戊巴比妥钠：国药集团化学试剂有限公司，批号：F20041117，25 g/瓶，肝素钠注射液：江苏万帮生化医药股份有限公司，12 500 u/（mL・支），青霉素钠注射液：山西太行药业股份有限公司，80万u/支。

1．2 方法

拟参考Lindell肝动脉插管法[1]及赖力英等人的方法[2]进行改进，具体步骤如下。

1．2．1 术前准备 术前1天停止喂食，自由饮水；将硬膜外麻醉导管置于60 ℃恒温水浴箱中，预热拉长为内径约0.5 mm的导管，插口处剪成锲形，管内插入0.5 mm动脉介入导管的金属导丝；于手术前30 min经大鼠尾静脉注射50 u/mL肝素钠溶液2 mL进行手术前血液肝素钠化；以2%戊巴比妥钠45 mg/kg腹腔注射麻醉。

1．2．2 造模方法 剑突以下的腹部剃毛后，络合碘消毒皮肤，手术按常规无菌手术规程操作。在腹部正中用手术刀切开皮肤切口2.5～3.0 cm，用无齿镊提起腹肌沿腹白线剪开腹肌，用止血钳钳夹切口两侧的腹肌，暴露肝脏；于胃与肝交界处用棉签钝性分离肝脏乳头叶，在其下方肝门区找到肝门静脉、肝固有动脉和胆管三者并行的Glisson系统，以最底下管径较粗的肝门静脉定位，中间外径较圆且有搏动的管道为肝固有动脉，下行分出胃十二指肠动脉及胃右动脉，右行为肝总动脉。去除血管外壁的结缔与脂肪组织，将各血管分离； 胃十二指肠动脉与胃右动脉交界处用0号丝线结扎血管，近心端用丝线套起备用，小动脉夹夹闭肝总动脉，在血管己经结扎处前方剪开血管壁约1/3~1/2（见图1），剪口前短暂松小动脉1次使胃右动脉血管充盈；将特制导管经胃、十二指肠动脉剪口入动脉血管,逆行到达肝固有动脉开口处，将导管内金属导丝退出,确认管腔通畅后，近心端用已经套起的丝线结扎并固定，松开动脉夹； 从腹壁引出导管并固定，连续缝合腹壁肌层。皮肤切口以75%乙醇消毒后用丝线缝合，引出的导管潜行于皮下至颈背部引出，用50 u/mL肝素钠生理盐水溶液封管，导管末端在乙醇灯下烧灼封口；术后大鼠臀部肌肉注射青霉素钠20 000 u/100 g，1次/3~5 d，防感染；隔天用生理盐水通管，并用50 u/mL肝素钠生理盐水溶液封管；每只大鼠单笼饲养。