反相高效液相色谱法测定水红花子中槲皮素的含量(一)

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作者：向梅先，苏汉文，闫云君

【摘要】 　　目的建立水红花子含量的测定方法。方法采用高效液相色谱法测定水红花子中的含量槲皮素，以C18柱为色谱柱，甲醇-0.4％磷酸溶液（42∶58）为流动相；检测波长为375 nm。按外标法进行检测。结果线性范围0.12～1.2 μg（r=0.999 9），平均回收率99.1％，RSD＝3.1%。结论此方法简便，准确。

【关键词】 高效液相色谱法； 水红花子； 槲皮素

　　Abstract：ObjectiveTo establish a method for the determination of quercetin from the fruits of Polygonum orientale L. MethodsQuercetin was determined by HPLC.The mobile phase was Methanol -0.4%Phosphorus acid glacial (42∶58) .The detection wavelength was set at 375 nm .The external standard method was used.ResultsThe quercetin sample size showed a good linear relationship at the range of 0.12～1.2 μg（r=0.999 9）. The average recovery of the added sample was 99.1％，RSD was 3.1%.ConclusionThe method is simple ,aurate.

　　Key words：HPLC； Fruits of Polygonum orientale L.； Quercetin

水红花子为红蓼的成熟果实，具有散血消症、消积止痛之功。用于症瘕痞块，瘿瘤肿痛，食积不消，胃脘胀痛等症。在前人对水红花子有关现代药理研究的基础上，本文对水红花子〔1〕的含量进行了相关研究，以期探讨该药材的指纹图谱研究，为该药材制定质量标准奠定基础。

　　1 材料

Agilent1100高效液相色谱系统〔美国Agilent公司〕,CIV-240IPC 紫外分光光度计（日本SHIMADZU 公司）；槲皮素对照品（中国药品生物制品检定所）； 水红花子购于湖北省中药材公司,药材经中南民族大学万定荣教授鉴定为蓼科植物红蓼的成熟果实即水红花子。所用试剂均为分析纯，水为注射用水。

　　2 方法与结果

　　2.1 色谱条件

　　色谱柱为Kromasil C18 250 mm×4.6 mm；柱温30℃；流动相为甲醇-0.4％磷酸溶液（42∶58）；流速1.0 ml・min-1；检测波长375 nm；进样量10 μl。色谱图见图1。

　　2.2 对照品溶液的制备

　　精密称定槲皮素对照品适量，置10 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，制成含槲皮素0.6 mg・ml-1的对照品溶液。

　　2.3 供试品溶液的制备

　　取水红花子粉末约5.0 g，精密称定，置索氏提取器中，加石油醚(60～90℃)80 ml，加热回流1 h，滤过，弃去石油醚液，药渣加甲醇80 ml，加热回流提取至无色，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇溶解并转移置10 ml量瓶中，稀释至刻度，摇匀，用0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。

　　2.4 线性关系考察

　　取配制含槲皮素0.06 mg・ml-1的对照品溶液，分别进样2，4, 6，8，10，20 μl测定槲皮素的吸收峰峰面积，以进样量(μg)为横坐标，吸收峰峰面积为纵坐标作图，得出回归方程为：Y=18.772X-4.751 7,r=0.999 9。结果表明,槲皮素进样量在0.12～1.2 μg范围内呈良好的线性关系。